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中华乌塘鳢(Bostrychus sinensis)Piscidin基因的克隆、表达及功能分析
学术精汇
作者:
李昊霖
1
汪晓玉
1
张建设
*
1
沈斌
*
1
作者单位:
1. 浙江海洋大学国家海洋设施养殖工程技术研究中心
摘要:
Piscidin抗菌肽是鱼体天然免疫系统的重要组成部分,具有广谱抗菌活性。中华乌塘鳢(Bostrychus sinensis)是一种广温广盐、低氧耐受性极强的鱼类,分布于我国黄海南部、东海、南海,以及日本海域等。利用PCR扩增获得了中华乌塘鳢Piscidin家族两个基因(命名为BsPis-1和BsPis-2)的cDNA序列。序列分析表明,BsPis-1基因包含225个碱基,编码74个氨基酸;BsPis-2基因包含216个碱基,编码71个氨基酸。序列比对显示BsPis-1和BsPis-2具有Piscidin家族的特征结构,信号肽相当保守;系统进化树分析显示BsPis-1与大弹涂鱼同源性最高,而BsPis-2与线鳢的同源性最高。荧光定量PCR结果表明BsPis-1和BsPis-2在健康鱼体鳃中的表达量最高;经副溶血弧菌感染后,除BsPis-1在脾脏中几乎不表达外,其他受检测组织中的BsPis-1和BsPis-2 mRNA的表达量在12 h后达到峰值。最小抑菌实验表明BsPis-1和BsPis-2合成肽具有广谱抗菌性,对4种常见水产致病菌均存在抑制效果,且BsPis-2的抑菌效果强于BsPis-1。扫描电镜(SEM)观察到BsPis-1和BsPis-2合成肽导致副溶血弧菌细胞膨大,细胞壁发生褶皱。添加合成肽后的头肾巨噬细胞对绿色荧光微球的吞噬能力显著增强。研究结果表明BsPis-1和BsPis-2抗菌肽在中华乌塘鳢的抗菌免疫过程中发挥重要作用。
关键词:
中华乌塘鳢
抗菌活性
吞噬活性
Piscidin
副溶血弧菌
刊期:
2025,
3
(56)
所属栏目:
研究论文_生物学
基金资助:
国家自然科学基金项目(42106101号)
分类号:
S917.4; Q953
DOI:
10.11693/hyhz20241200283
页数:
10
页码:
736-745
来源期刊
海洋与湖沼
Oceanologia et Limnologia Sinica